Was ist ein Endotoxintest?

Was ist ein Endotoxintest?

Endotoxine sind hydrophobe Moleküle, die Teil des Lipopolysaccharidkomplexes sind, der den größten Teil der Außenmembran gramnegativer Bakterien bildet.Sie werden freigesetzt, wenn die Bakterien absterben und ihre äußeren Membranen zerfallen.Endotoxine gelten als Hauptverursacher der pyrogenen Reaktion.Und mit Pyrogenen kontaminierte parenterale Produkte können beim Menschen zur Entwicklung von Fieber, zur Auslösung einer Entzündungsreaktion, zum Schock, zum Organversagen und zum Tod führen.

Der Endotoxintest ist ein Test zum Nachweis oder zur Quantifizierung von Endotoxinen gramnegativer Bakterien.

Zunächst werden Kaninchen zum Nachweis und zur Quantifizierung von Endotoxinen in pharmazeutischen Produkten eingesetzt.Laut USP beinhaltet die RPT die Überwachung auf einen Temperaturanstieg oder Fieber nach intravenöser Injektion des Arzneimittels bei Kaninchen.Und 21 CFR 610.13(b) erfordert einen Kaninchen-Pyrogentest für bestimmte biologische Produkte.

In den 1960er Jahren fanden Fredrick Bang und Jack Levin heraus, dass Amöbozyten des Pfeilschwanzkrebses in Gegenwart von Endotoxinen gerinnen.DerLimulus-Amöbozyten-Lysat(oder Tachypleus-Amöbozyten-Lysat) wurde entsprechend entwickelt, um die meisten RPT zu ersetzen.In der USP wird der LAL-Test als bakterieller Endotoxintest (BET) bezeichnet.Und BET könnte mithilfe von drei Techniken durchgeführt werden: 1) der Gel-Clot-Technik;2) die turbidimetrische Technik;3)die chromogene Technik.Zu den Anforderungen für den LAL-Test gehören der optimale pH-Wert, die optimale Ionenstärke, die Temperatur und die Inkubationszeit.

Im Vergleich zu RPT ist BET schnell und effizient.Allerdings konnte BET RPT nicht vollständig ersetzen.Da der LAL-Assay möglicherweise durch Faktoren beeinträchtigt wird, ist er nicht in der Lage, Nicht-Endotoxin-Pyrogene nachzuweisen.